PCR təcrübələrində geniş istifadə olunan bir neçə ferment

Polimeraza zəncirvari reaksiya, qısaldılmış kimiPCRİngilis dilində, xüsusi DNT fraqmentlərini gücləndirmək üçün istifadə olunan molekulyar biologiya texnikasıdır.Çox az miqdarda DNT-ni çox artıra bilən bədəndən kənarda xüsusi bir DNT replikasiyası kimi qəbul edilə bilər.Bütün ərzindəPCRreaksiya prosesində maddələrin bir sinfi - fermentlər mühüm rol oynayır.

1. Taq DNT

İlk günlərdə təcrübələrdəPCR, elm adamları Escherichia coli DNT polimeraza I-dən istifadə etdilər, Lakin bu fermentlə bağlı bir problem var: hər dövr həyata keçiriləndə o, yeni fermenti doldurmalıdır ki, bu da əməliyyat addımlarını bir qədər mürəkkəbləşdirir və tam avtomatik gücləndirilməsi çətindir.1988-ci ildə alimlər təsadüfən Thermus aquaticus-dan Taq DNT polimerazanı təcrid etdikdən sonra bu problem həll olundu. O vaxtdan bəri DNT-nin avtomatik gücləndirilməsi reallığa çevrildi.Bu fermentin kəşfi də edirPCRtexnologiya rahat, praktik və universal texnologiyadır.Hazırda Taq DNT polimeraza DNT dəstlərində ən çox yayılmış polimerazadır.

2. PfuDNA

Yuxarıda qeyd edildiyi kimi, Taq DNase-də böyük bir səhv var, buna görə də elm adamları uyğunsuzluq səbəbindən qeyri-spesifik gücləndirmənin qarşısını almaq üçün Taq DNT polimerazını müəyyən dərəcədə dəyişdirdilər, nəticədə qeyri-dəqiq test nəticələri.Lakin Taq DNT polimerazanın modifikasiyası otaq temperaturunda DNT polimerazanın fəaliyyətini maneə törədə bilər.PfuDNA polimeraza Taq DNT polimerazasının yuxarıdakı çatışmazlıqlarını yaxşı şəkildə kompensasiya edə bilər ki, PCR reaksiyası normal şəkildə həyata keçirilə və hədəf genin gücləndirilməsinin müvəffəqiyyət dərəcəsi effektiv şəkildə artırıla bilər.

3. Əks transkriptaza

Əks transkriptaza 1970-ci ildə kəşf edilmişdir. Bu ferment şablon kimi RNT-dən, substrat kimi dNTP-dən istifadə edir, əsas cütləşmə prinsipinə əməl edir və 5′-3′ istiqamətində RNT şablonunu tamamlayan DNT tək zəncirini sintez edir.Əks transkriptaza ilk növbədə DNT və ya RNT şablonlarından DNT polimeraza aktivliyindən asılıdır və buna görə də 3′-5′ eksonükleaz aktivliyinə malik deyil.Bununla belə, əks transkriptazın sintez uzunluğunu müəyyən dərəcədə məhdudlaşdıran RNase H aktivliyinə malikdir.Vəhşi tərs transkriptazın aşağı sədaqəti və termostabilliyi səbəbindən elm adamları onu da dəyişdirdilər.

üçünPCReksperimentlər zamanı əsas istehlak materialları bunlardır: fərdi PCR borusu, 4/8 zolaqlı PCR borusu, PCR lövhələri.

LabionunPCR istehlak materiallarıaşağıdakılara sahib olunüstünlükləri:

PCR plitələri: Geniş termal cycler uyğunluğu;Yüksək kontrastlı, quyuların asan identifikasiyası;yaxşı floresan əks; yaxşıistilikötürmə;Sertifikatlaşdırılmış DNase, RNase, DNT, PCR inhibitorları və sınaqdan keçirilmiş pirojensiz.

Fərdi PCR boruları: Buxarlanmaya davamlı; yaxşıistilikötürmə;əla optik aydınlıq; Sertifikatlı DNase, RNase, DNT, PCR inhibitorları və sınaqdan keçirilmiş pirojensiz.

4/8 zolaqlı PCR boruları: Ultra nazik divarlar; yüksək aydınlıq; yaxşı flüoresan əks etdirmə;əczaçılıq sənayesində, qida sənayesində və molekulyar biologiyada istifadə edilə bilər; yüksək keyfiyyətli, bakirə PP materialı; Sertifikatlı DNase, RNase, DNT, PCR inhibitorları və sınaqdan keçirilmiş pirojensiz.